细胞培养和血清制品制备中极易发生支原体污染，被污染早期往往难以察觉，严重影响实验结果。常用的支原体检测方法有直接培养法、DNA染色法和PCR法等，其中实时荧光定量PCR法（qPCR）在检测准确率、特异性和敏感性上都有明显的优势。
图1 不同检测方法的比较（Molla Kazemiha et al., 2016）
GSDetectTM Taqman Mycoplasma Detection Kit (UNG plus) 基于Taqman qPCR法，针对支原体16S rRNA的保守区域序列，设计特异性引物和荧光探针（FAM标记）用于支原体DNA的检测。本试剂盒可直接以细胞培养上清或血清等生物材料为模板，检测常见的16种支原体污染。
试剂盒内添加dUTP/UNG酶体系，能避免PCR产物气溶胶污染导致的假阳性，大幅提高检测的准确性。
产品特点
1 操作简便，直接使用1 μL细胞培养上清或血清进行检测，无需提取DNA。
2 检测灵敏度高，准确率高，耐受青霉素和链霉素或其他抑制物的影响。
3 特异性强，只能扩增支原体DNA，不会扩增细菌真菌或真核细胞的DNA。
4 检测快速，最快1小时即可判定结果。
产品组分
D0101 24 rxns | 组分名称 | 规格
| 主要成分 |
|
GSDetectTM Myco Mix A
| 280 μL
| 特异性引物、探针等
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GSDetectTM Myco Mix B
| 304 μL
| 热启动Taq酶、UNG酶等
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Myco-Positive Mix
| 25 μL
| 含阳性序列的DNA片段
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Myco-Free Water
| 50 μL
| 支原体阴性的超纯水
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D0102 96 rxns
| GSDetectTM Myco Mix A
| 4×280 μL | 特异性引物、探针等 |
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GSDetectTM Myco Mix B
| 4×304 μL | 热启动Taq酶、UNG酶等
|
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Myco-Positive Mix
| 100 μL | 含阳性序列的DNA片段
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Myco-Free Water
| 200 μL | 支原体阴性的超纯水
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可检测的支原体类型
M. orale*
| M. mycoides
| M. capricolum
| M. arthritidis
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M. gallisepticum
| M. hominis*
| M. hyorhinis*
| M. penetrans
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M. pirum*
| M. salivarium*
| M. synoviae
| M. arginini*
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M. fermentans*
| M. pneumoniae
| M. genitalium
| A. laidlawii*
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*：培养细胞中污染最常见的支原体类型。
参考文献
1. Nikfarjam L, Farzaneh P. Prevention and detection of Mycoplasma contamination in cell culture. Cell J. 2012 Winter;13(4):203-12.
2. Molla Kazemiha V, Bonakdar S, Amanzadeh A, Azari S, Memarnejadian A, Shahbazi S, et al., Real-time PCR assay is superior to other methods for the detection of mycoplasma contamination in the cell lines of the National Cell Bank of Iran. Cytotechnology. 2016 Aug;68(4):1063-80.
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