免疫共沉淀（Co-IP）

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation，Co-IP)技术是以抗原、抗体间的特异性免疫反应为基础，研究蛋白质间相互作用的经典方法。与其它研究蛋白质相互作用的方法相比，免疫共沉淀是在生理条件下检测蛋白质间相互作用，因此，不仅可以检测到体内形成的天然复合体，而且可排除过表达靶蛋白所带来的假阳性；由于内源性的靶蛋白是完全加工、修饰成熟的蛋白质，因此，依赖于修饰的蛋白质间相互作用也可以被检测到。

实验原理

免疫共沉淀技术原理是以细胞内源性靶蛋白(protein X)为诱饵，将protein X的抗体与细胞总蛋白进行共孵育，促进免疫复合物的形成；随后加入能够与抗体Fc段结合的protein A/G(预先结合固化在琼脂糖微珠上)，这样在protein X所在的环境中与其有相互作用的蛋白(protein Y)会被一起沉淀下来，形成"结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-protein A/G微珠"复合物，纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白，应用Western blot 或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。

实验流程

服务项目