转录因子ChIP测序
ChIP测序(Chromatin immunoprecipitation and high-throughput sequencing,ChIP-seq)是将染色质免疫沉淀与高通量测序相结合的技术,通过蛋白免疫相互作用,用抗体把和染色质相互作用的蛋白(如转录因子等)沉淀下来,捕捉到细胞内动态的、瞬时的蛋白质与DNA之间的相互作用,从而所获取与其相结合的DNA序列,确定各种转录因子以及染色体结合蛋白在染色质上的具体位置。可以一次性得到目的蛋白在整个基因组上的结合分布,得到目的蛋白精确的结合位点以及结合基序等信息。
若同时辅以转录组测序,则可以帮助得到目的蛋白对全细胞基因表达的调控模式,大幅提高对目的蛋白的功能认识。这种在 DNA-蛋白质相互作用研究方法上的重大突破,极大的推进了基因表达调控的发展。
建库方法及技术流程
结果展示
A:IP质检结果(input:样品裂解液中目的蛋白检测结果,IP:抗体富集目的蛋白检测结果,IgG:IgG富集目的蛋白结检测果);
B:Reads在基因上下游的分布,结合峰主要位于转录起始位点(TSS)上游区域(ChIP_1/2/3为3个生物学重复);
C:Peak在基因组各功能区的分布;
D:Peak的Motif分析。