活细胞动态成像

活细胞成像(live cell imaging)统称为捕捉活的、活动状态的细胞图像的技术，这些细胞图像可以是单个静态图像，也可以是延时系列图像。

华瑞邦研引进国际领先活细胞成像系统Incucyte S3，采用非侵入式的方法，记录细胞的实时生长状态，扩充了用户记录和研究 细胞生长、细胞行为和细胞形态的途径，广泛适用于细胞生物学、药物筛选、肿瘤研究等领域.

技术优势

实时动态成像——还原生物学过程动态全貌

强大软件——输出发表级曲线及影像资料

业界认可——超3900篇文献资料

应用全面——超20种以上应用

工作流程

应用方向

案例1——细胞健康状态与细胞凋亡

使用针对活细胞分析进行了优化的荧光染料，细胞凋亡、细胞健康读数同时检测。例如，细胞凋亡可以通过Annexin V和Caspase 3/7活性来测量。

多重细胞表面标记，吞噬活性和增殖测量以及形态学可视化以研究分化。在与CD11b，CD14或CD40复合的IncuCyte FabFluor-488抗体存在下，将THP-1单核细胞暴露于培养基（未分化），维生素D3或PMA。与单独的培养基或经维生素D3处理的细胞相比，PMA在细胞形态（HD相对比图像）上显示出显著变化。动力学曲线突出显示了响应于各种处理的差异和时间依赖性表面蛋白表达。有趣的是，通过用IncuCyte pHrodo红细胞标记试剂盒标记的凋亡性Jurkat细胞的胞吞作用，PMA而不是培养基或维生素D3会导致细胞增殖（融合）减少和吞噬潜力一致增加。

案例2——免疫细胞杀伤
细胞毒性T细胞（CTL），自然杀伤（NK）细胞和某些中性粒细胞具有杀死感染或恶性细胞的能力。尽管杀伤机制可能不同（例如释放细胞因子，细胞毒性颗粒或ROS，Fas / FasL相互作用），但最终这些免疫防御通过细胞裂解使不需要的细胞失活。细胞溶解测定法通常涉及从垂死的靶细胞中测量Cr51或细胞酶（例如LDH）的释放。如果涉及凋亡机制，则可以使用Annexin V或胱天蛋白酶3/7激活的生化测定。主要挑战是：（1）高背景信号；（2）区分可能来自效应细胞的信号。（3）知道何时测量终点。
活细胞分析提供了多种细胞溶解测量方法。最简单地，可以用荧光蛋白（例如RFP）标记靶细胞，并在裂解时监测红色荧光的损失。例如，THP-1细胞被核靶向RFP稳定转染并铺在96孔板上。预激活的PBMC（抗CD3 / IL2，72小时）的加入导致THP-1细胞快速且时间依赖性地裂解，最终导致RFP信号完全丢失。细胞溶解的速率取决于PBMC的数量（比例1：1至1:10）。通过检查细胞图像验证了细胞溶解信号，显示了膜破坏，运动性丧失和靶细胞的收缩。类似的测定原理可以应用于杀死肿瘤球体。在下图中，在添加PBMC之前，形成了表达A549NucLight Red的肿瘤细胞，并以3D球状体的形式在超低附着平板中生长了3 d。随着时间的流逝，PBMC对球体杀伤，同时红色荧光信号减弱消失。

激活的PBMC对肿瘤球体增殖的影响。